详细产品购买方式、发货周期、技术疑问可以咨询在线客服或者拨打销售深圳子科生物科技有限公司。

产品名称：重组蛋白A/G预装柱/填料

重组蛋白G预装柱：

 重组蛋白G填料：

技术指标：每毫升rProtein G结合18-45mg人血清IgG，18-42mg兔IgG /ml填料，4.5-15mg鼠血清IgG/ml填料，5-15mg鼠腹水IgG/ml填料

一、 重组蛋白A/G预装柱/填料产品简介

蛋白G可与多数哺乳动物IgG的Fc端特异性结合。使用的rec-Protein G是通过基因工程-重组蛋白的方法表达获得。由于重组表达的rec-Protein G去除了除Fc端以外的其他非特异性结合位点，特异性更好。

本产品采用“高配基、高浓度、小体积”的创新偶联技术，将填料中有限的羟基(-OH)结合位点充分活化，使得单位体积中结合更多蛋白G，最终纯化效率较普通偶联有30%的提高。蛋白G偶联填料可直接用于血清、腹水中IgG抗体纯化，或用于含Fc片段的重组蛋白的纯化。

二、产品技术指标

    rec-Protein G/Sepharose 比值：2.7~3.2mg rec-Protein G/ml Sepharose

    rec-Protein G分子量：22.5KDa

每分子rec-Protein G可结合IgG位点数：2个

rec-Protein G可结合白蛋白位点数：无

    线性流速：300-500 cm/h

    耐压指数：≤0.3 MPa（填料）

三、注意事项

请在实验前仔细阅读本rProtein G预装柱使用说明。同时，将所要的所有试剂、耗材拿出置于室温，恢复至室温使用。

四、产品保存

产品储存于2-8℃，保质期两年。

五、重组蛋白A/G预装柱/填料 rec-Protein G预装柱纯化IgG抗体步骤

以下实验方法适用于从血清或腹水中纯化IgG抗体，不同来源的IgG与rec-Protein G的结合能力不同，具体情况请参考表1。

1. 将血清或腹水样品（推荐上样量2 mL样品/mL柱）装入截留分子量3.5 KDa透析带中，于4 ℃冰箱中对1× PBS（pH 7.4）透析过夜；

2. 将rec-Protein G-Sepharose装柱固定好，用10倍柱体积1× PBS（pH 7.4）平衡层析柱，建议流速为1 mL/min；

3. 将透析好的样品从层析柱上端加入，建议流速为1 mL/min，为了获得更好的抗体结合效果可将流穿液再上样，重复2遍（或将样品1次性加入层析柱后置于摇床上，轻轻摇动，结合30 min）；

4. 样品结合后，用20倍柱体积1× PBS(pH 7.4)洗涤层析柱，建议流速为1 mL/min，勿让层析柱滴干；

5. 洗脱IgG，向层析柱上端加入洗脱液（100 mM甘氨酸，pH 2.7），用预先加有100 μL中和缓冲液（1M Tris，pH 9.0）的4 mL Ep管接收，2 mL /管，共收集10倍柱体积，进行10 % SDS-PAGE电泳，确定IgG样品所在管，回收样品。

6. 用5倍柱体积再生缓冲液（100 mM甘氨酸，pH 2.0）进行再生处理，再加入10倍柱体积ddH2O清洗层析柱。*于层析柱中加入10倍柱体积, 20% Ethanol，4~8 ℃冰箱保存处理。

六、同类产品纯化效果比较

  美国某知名品牌的rProtein G Sepharose 4FF 亲和层析柱对人血清进行纯化，其对人IgG的*结合量约为34 mg/mL Medium。

重组蛋白A/G预装柱/填料

表1 rProtein G与不同来源Ig的反应活性情况

重组蛋白A/G预装柱/填料

表2  rProtein G预装柱系列产品参数