产品名称：人25羟基维生素D3（25-OH-D3）ELISA检测试剂盒

产品特点：灵敏性高、特异性强、重复性好、精密度准、简便性强、安全性高、经济性省；
产品可提供服务：子科生物所有的elisa试剂盒均可免费代测，全程Elisa实验技术指导。
产品运输：全国各地快递免费送货上门，低温运输，用冰袋加泡沫保温盒包装，确保产品运输状态下也处于低温状态，而且我公司试剂盒所有组份做过42度 7天破坏实验，产品效价降低幅度不超过7%，能确保运输过程中的温度变化不会对试剂盒造成效价影响
产品检测范围：欢迎或电13924667705白经理索取原版说明书。

深圳子科生物自主研发酶联免疫分析检测试剂盒，品牌为ZIKER,可以检测Human，Rat、Mouse、Porcine、Sheep、Monkey、Goat、Bovine、Canine、Rabbit、Chicken、Duck、Fish、Plant??等各种样本，品种齐全，质量保证，免费代测、技术全程支持服务，我公司长期跟各大高校科研实验室保持课题合作，经验丰富，质量稳定！我们所有的产品都是我司直接供货，无中间差价，直接供货，让您以*惠的实验预算完成您的实验！

[人25羟基维生素D3（25-OH-D3）ELISA检测试剂盒]可以检测的样本如下：
● 液体类标本：人、动物血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
● 培养细胞上清液
● 组织标本

血清样本收集和检测注意事项：
1）血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。
2） 血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。
3）一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。

[人25羟基维生素D3（25-OH-D3）ELISA检测试剂盒]操作过程主要步骤总结如下：
稀释--加样--温育--配液--洗涤--加酶--温育--洗涤--显色--终止--测定

实验详细操作步骤如下：
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。
5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
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