NBT/BCIP碱性磷酸酶显色试剂，蓝色

英文名 ：NBT/BCIP, Blue

规格    ：5次/盒

品牌    ：子科生物ZIKER

运输和保存条件：常温下运输，收到后将溶液A和溶液B-20℃闭光保存，显色缓冲液和反应终止液2-8℃保存，保质期一年。

本产品的详细报价、说明书、规格、品牌、技术参数、使用操作可以咨询子科生物在线销售人员QQ：2811391951或者电话联系:0755-66609091.

产品概述：

NBT即四唑氮蓝（Nitro-Blue-Tetrazolium），为深蓝色无定形微溶物质；BCIP即5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐（5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate）。当二者存在时，在碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase, AP）作用下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成显微镜下可见的蓝色或紫蓝色沉淀。常用于免疫组化、原位杂交、Western Blot等膜显色或细胞、组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。本试剂是为免疫组化、原位杂交、Western Blot等膜显色专门配制的，能够使用5次，适合的膜大小为6 × 8cm。

NBT/BCIP碱性磷酸酶显色试剂，蓝色

产品组成：

溶液 A         0.35 mL

溶液B          0.18 mL

显色缓冲液     5×10 mL

反应终止液     50 ml

操作步骤：

1. 在免疫印迹(western blot)实验中，先将相应的AP（碱性磷酸酶）标记的二抗覆盖膜后，37℃于震荡器上震荡1-1.5Hour，再用TBST或者PBST洗涤膜3~4次，将膜转移到阴暗处。

2. 显色前先取显色缓冲液2mL吸取到一个15 mL的干净瓶子中，用双蒸水进行5倍稀释，再取66 μL溶液A和33 μL溶液B加入其中，充分混合。

3. 在阴暗处将10 mL的混合液加入膜上，将膜覆盖。37℃震荡反应30 min即可，这时有蓝色或蓝紫色的条带出现。

4. 加入10 mL的反应终止液。将膜覆盖，震荡1min，用双蒸水冲洗条带3~4次。

5. 30 min内照像记录实验结果，否则所产生的颜色会渐渐褪去。

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NBT/BCIP碱性磷酸酶显色试剂，蓝色

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